1, 액체 질소에서 블레이드 연삭
2. 3 배의 부피의 샘플을 넣고-20 C 에서 밤을 지낸 후 원심 (4 C 이상 8000rpm, 4 C 하 65438 0 시간) 하여 상청액을 버린다.
3. 등체적인 얼음욕 아세톤 (0.07%β- 메르 캅토 에탄올 포함) 을 넣고 잘 흔들어 원심력 (4℃8000rpm 이상, 4℃ 65438 0 시간) 으로 침전물을 진공 건조시켜 준비한다.
4. 상전 전에 분해액을 넣고 실온을 30 분 동안 그대로 두어 단백질을 분해액에 충분히 녹인 다음 원심력 (65438 05 C, 8000 rpm, 65438 0 시간 이상, 무침전을 기준으로 함), 4 C 준비
5. Brandford 방법으로 단백질을 정량한 후 포장하여-80 C 아래에 준비한다.
약물:
추출물: 65438±00% TCA 와 0.07%β- 메르 캅토 에탄올을 함유 한 아세톤.
분해물: 2.7g 우레아와 0.2gCHAPS 를 3ml 멸균 이온수 (최종 부피는 5ml) 에 녹여 사용하기 전에 1M DTT65ul/ml 을 넣는다.
이 방법은 2 차원 전기 영동의 특징을 겨냥하여 불순물이 적고 이온 농도가 낮다! 물론 단방향 전기 영동도 적용되지만 전기 영동의 띠는 줄어든다!